近年来随着生命科学技术荧光探针技术、荧光显微镜、偏振荧光检测技术、多光子荧光检测技术、PCR基因扩增荧光定量检测等生物医学检测技术不断涌现,对光学滤光片的陡度、背景深度提出了更高的技术要求。
我们都知道
光学滤光片是生物医学领域中重要的检测手段之一,光学滤光片组是进行激发光选择和荧光提取的关键光学元件, 需根据所选试剂的激发、发射特性设计相应的滤光片光谱。一般我们要求要求滤光片背景深度在OD5以上,才能有较好的荧光成像效果。
荧光试剂受激发射荧光的持续时间很短暂:发射荧光亮度相当于激发光能量的千分之一到万分之一的量级,相对于激发光,荧光就显得非常的微弱,二者共存于测试样品中;并且荧光的激发光谱与发射光谱波长间隔很小(15nm-30nm左右),所以我们要检测到荧光信号,要把荧光系统中的激发光与发射光在光谱中相互深度隔离。隔离度达到OD4以上,才能检测到样品发射的荧光信号。为提高荧光检测准确度,需要将隔离度提高到OD5以上。而且滤光片的隔离度越高,微量荧光的探测能力越强,荧光显微镜检测精度越高。
所以在荧光显微镜的滤光片的核心要求就是高截止陡度、滤光片高透过率、滤光片邻域背景截止度。
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